代谢组学
捕捉表型变化的直接信号，精确量化代谢产物，直观反映生物体的生理状态响应。
维生素
维生素代谢物（Vitamin Metabolites）是维生素在体内经吸收、转化、降解形成的一系列中间产物与终产物，涵盖维生素前体、活性代谢物、降解产物等，如维生素 D 的活性形式 25 - 羟基维生素 D₃、叶酸的代谢产物 5 - 甲基四氢叶酸、维生素 B6 的活性形式磷酸吡哆醛等。 作为营养代谢网络的核心组成，维生素代谢物不仅直接反映维生素的吸收利用效率，更参与能量代谢、基因表达调控、免疫功能调节等关键生理过程。其代谢紊乱与慢性病（糖尿病、心血管疾病）、神经退行性疾病、出生缺陷等密切相关。相较于单一维生素检测，维生素代谢物全景分析能精准捕捉 “摄入 - 转化 - 利用” 全通路的功能状态，为营养评估、疾病早期预警及机制研究提供更深度的分子依据。 目前，维生素代谢物检测已成为营养学、临床医学、转化医学等领域的研究热点，广泛应用于个性化营养指导、慢性病风险评估、药物疗效监测、特殊人群健康管理等场景，为精准营养与疾病防控提供关键技术支撑。
原理介绍
维生素代谢物检测的核心原理基于 “全景提取 - 高效分离 - 精准定性定量” 的技术体系，结合代谢物理化特性设计： 1.提取原理：采用混合溶剂（如甲醇 - 乙腈体系）或缓冲液，同步提取脂溶性与水溶性维生素代谢物，通过固相萃取去除蛋白质、脂质等杂质，避免代谢物降解； 2.分离原理：利用超高效液相色谱（UHPLC），基于代谢物极性、疏水性、分子量的差异，实现不同类别、不同亚型维生素代谢物的高效分离； 3.定性定量原理：结合三重四极杆质谱（QQQ-MS）或高分辨质谱（HRMS），通过特征母离子 - 子离子对匹配、保留时间与标准库比对实现精准定性，采用稳定同位素内标法（如 25 - 羟基维生素 D₃-d₆、5 - 甲基四氢叶酸 - d₃）校正基质效应与提取损失，实现全代谢组的准确定量。
文献案例
《Randomized Controlled Trial》发表题为 “Effect of Vitamin D and ω-3 Fatty Acid Supplementation on Risk of Age-Related Macular Degeneration: An Ancillary Study of the VITAL Randomized Clinical Trial” 的研究论文，该研究通过维生素代谢物检测技术，明确了维生素 D 补充与年龄相关性黄斑变性（AMD）风险的关联，为眼病预防提供了科学依据。 研究将受试者随机分为维生素 D 补充组、ω-3 脂肪酸补充组、联合补充组及安慰剂组，随访 5 年。期间采集受试者血清样品，采用 UHPLC-QQQ-MS 技术检测维生素 D 代谢物（25 - 羟基维生素 D₃、1,25 - 二羟基维生素 D₃）及相关代谢中间产物的含量变化。结果显示，补充组受试者血清中活性维生素 D 代谢物 25 - 羟基维生素 D₃含量较安慰剂组显著升高，且 AMD 发病风险降低 23%；其中，基线时 25 - 羟基维生素 D₃水平较低（\<20ng/mL）的受试者，补充后 AMD 风险降低更为明显（31%）；而联合补充维生素 D 与ω-3 脂肪酸的受试者，风险降低幅度未显著优于单独补充维生素 D 组。该研究通过精准检测维生素 D 代谢物水平，证实补充维生素 D 可通过调节其活性代谢通路降低 AMD 发病风险，为年龄相关眼病的营养预防策略提供了关键的代谢学证据。
送样标准
体积≥500μL / 份，EDTA 或肝素抗凝（血浆），-80°C 密封保存，干冰运输；避免反复冻融，需注明采样时间（空腹 / 餐后）、维生素补充剂服用情况
体积≥1mL / 份，EDTA 抗凝，-80°C 密封保存，干冰运输；适用于叶酸、维生素 B12 代谢物检测，避免溶血
体积≥2mL / 份，-80°C 密封保存，干冰运输；可添加 0.1% 叠氮钠防腐，注明采样类型（24h 尿 / 晨尿）
动物组织≥1g、植物组织≥2g，液氮速冻后 - 80°C 保存，干冰运输；需明确组织部位（如肝脏、叶片）及处理条件（如药物干预、培养环境）
重量≥5g / 份，密封后 - 20°C 保存，冰袋运输；需明确样品类型（如谷物、乳制品、饲料）及加工状态
交付内容
原始检测数据
包括 UHPLC-MS 原始图谱、各代谢物保留时间、特征离子峰信息、峰面积定量原始数据及标准库匹配报告；
数据分析报告
涵盖 30 + 种维生素代谢物定性鉴定结果、含量定量表（单位：ng/mL、μg/g 等）、代谢物差异火山图、通路富集分析图、与标准参考值的对比分析及营养代谢状态评估结论；
技术支持文档
提供样品前处理优化方案（提取溶剂配比、净化步骤）、UHPLC-MS 检测参数表（色谱柱型号、流动相梯度、质谱电离条件）、代谢通路解析指南及个性化营养干预建议。
常见问题
①优化样品前处理流程，增加固相萃取或液 - 液萃取步骤，去除蛋白质、色素、脂质等杂质；②调整色谱条件（更换色谱柱类型、优化流动相 pH 值与梯度洗脱程序）改善分离效果；③采用质谱 MRM 靶向扫描模式，提高检测特异性，避开干扰离子峰；④使用高纯度试剂与内标，减少试剂污染带来的干扰。
①样品采集条件不一致（饮食结构、采样时间、维生素补充剂服用剂量不同）；②样品处理流程不统一（提取时间、离心转速、净化步骤差异）；③仪器状态波动（色谱柱性能衰减、质谱检测器灵敏度变化）；④生物样品本身的个体代谢波动。建议严格控制采样与处理的标准化流程，检测前校准仪器，设置平行样验证（RSD≤10%）。
①使用维生素代谢物标准品混合物进行回收率实验，回收率在 85%-115% 范围内说明方法可靠；②添加多种稳定同位素内标，校正样品前处理与检测全过程的误差；③采用认证参考物质（CRM）进行质量控制，确保定量准确性；④设置空白对照（提取溶剂空白、样品空白）排除污染干扰；⑤通过平行样检测验证结果重复性（RSD≤10%）。
