蛋白组学
解析蛋白质组组成，挖掘关键生物标志物，从功能执行终端解读生命机理。
OLINK 靶向蛋白组
Olink靶向蛋白组学分析是依托邻位延伸技术（Proximity Extension Assay, PEA） 开发的新一代高特异性、高 multiplex 蛋白标志物检测技术，核心聚焦精准靶向+超微量样本+临床转化，通过双抗体识别与DNA耦合信号放大，实现对体液、细胞或组织样本中特定蛋白组的定量分析。其核心创新在于解决了传统免疫分析通量低、样本用量大、低丰度蛋白检出难的痛点，以及质谱蛋白组学临床样本兼容性差、成本高的局限。
原理介绍
Olink蛋白质组学技术是一种高通量的蛋白质检测方法，可以同时检测数百种蛋白质，并且具有高灵敏度和高特异性。其技术原理主要是：Probe 设计：Olink 技术使用了一种称为 proximity extension assay（PEA）的方法，该方法利用两种具有特异性的抗体，即Proximity Probe，分别识别待检测蛋白质的不同位点。这两种Proximity Probe 上分别连接有一种DNA分子，当两种Probe 接近并结合到待测蛋白上时，两种DNA分子可以形成一个连通的DNA链。扩增：所有DNA链同时被扩增成数百万个复制物，并且在扩增过程中添加了标记的核酸，这些标记的核酸是与每个DNA链上的特定序列相匹配的。检测：所有扩增的DNA链随后被检测，检测过程中使用一种叫做 Olink PCR 的方法，该方法使用一种称为Universal PCR Probe的探针，与所有扩增的DNA序列都相匹配。PCR反应产生荧光信号，标记的核酸序列的数量与待检测蛋白质的数量成正比。
文献案例
《Frontiers in Neurology》期刊上发表的“Biomarkers and therapeutic targets in early Alzheimer’s disease: an Olink proteomics study.”纳入30例受试者（10例健康对照HC、10例轻度认知障碍MCI、10例PET确诊早期AD），采用Olink Inflammation Target 96面板（检测92种炎症相关蛋白）分析血浆样本，探索AD早期诊断标志物。与HC组相比，AD组中6种蛋白显著上调；MCI组中UPA与CDCP1已显著上调，提示这两种蛋白可作为AD前驱期标志物；功能富集显示，差异蛋白主要参与神经炎症、神经元死亡与突触功能异常，为AD早期干预提供靶点。研究论文首次通过Olink技术验证血浆炎症蛋白作为AD早期标志物的可行性，解决AD早期诊断缺乏无创指标的痛点。
交付内容
数据质量控制报告
样本质量：蛋白降解程度（通过内参蛋白检测评估）、污染率； PEA反应质量：阳性对照扩增效率、阴性对照信号、CV值分布（≤10%为合格）； 定量质量：蛋白检出率、批次效应校正结果（PCA图显示批次聚类消失）。
蛋白定量与注释结果
定量矩阵：Target系列、Explore HT（npx值），含蛋白名称、log2FC、P值、FDR值； 差异分析结果：差异蛋白列表、火山图、热图； 数据库注释：蛋白功能描述、疾病关联、通路归属、已知标志物信息。
功能分析结果
临床价值分析：ROC曲线、生存分析曲线、风险评分模型（如卵巢癌11蛋白签名）； 通路富集：GO/KEGG富集散点图（Top20通路）、蛋白互作网络）； 定制化分析：大队列样本的蛋白-表型关联热图、pQTL关联分析。
分析与解读报告
核心结论：关键标志物候选名单、蛋白-疾病关联强度、临床转化潜力； 结果解读：差异蛋白的生物学意义、技术优势说明。
常见问题
多组学联合关键注意事项：样本一致性：必须使用同一来源、同批次处理的样本，避免样本差异导致关联偏差；调控方向匹配：关注“蛋白表达与mRNA一致/互补”的分子；通路聚焦：取三组学共同富集的通路，锁定核心调控轴；工具支持：提供“Olink-转录组-代谢组”整合分析模块，可自动生成调控网络。
重复性与批次效应控制通过“技术设计+实验流程”保障。 重复性：生物学重复R²≥0.95，技术重复R²≥0.98；批次效应控制：①实验设计：每批加入20%的质控样本，监测批次稳定性；②数据校正：使用Olink Insight软件的“ComBat”算法，消除批次差异；③流程标准化：统一抗体对批次、PCR/NGS参数、样本处理人员；样本案例：UKB-PPP项目54万样本分1000批检测，批次校正后数据一致性达98%，支持跨批次联合分析。
