单细胞组学
在单细胞分辨率下解析组织异质性，精准定义细胞亚群及其分化轨迹。
DNBELAB单细胞 VDJ
DNBelab单细胞V(D)J测序技术是华大基因依托自主研发的DNBelab C4建库系统与DNBSEQ测序平台，打造的高通量免疫组学技术，核心聚焦T细胞受体（TCR）和B细胞受体（BCR）的多样性解析，可在单个细胞水平同步获取T/B细胞的受体基因序列、克隆型特征及功能表型信息，精准追溯免疫细胞克隆起源、扩增轨迹与功能状态。 作为国产单细胞V(D)J技术标杆，其打破了进口平台的技术与成本壁垒，依托高密度DNB阵列的无偏捕获特性，兼具高通量、高灵敏度、多模态兼容的核心优势，相较于传统批量V(D)J测序，能有效避免细胞群体平均化干扰，精准捕捉稀有免疫细胞克隆，同步兼容单细胞转录组、蛋白标记数据联动分析。该技术广泛应用于肿瘤免疫治疗疗效评估、感染性疾病免疫应答解析、自身免疫病机制研究、疫苗研发等领域，为免疫相关科研与临床转化提供自主可控的深度分子支撑。
J_WH_1000x1000px.webp&w=640&q=75)
原理介绍
DNBelab单细胞V(D)J测序技术基于“高密度DNB阵列原位捕获-靶向扩增-专属Barcode标记”的核心逻辑，无需依赖油包水微流控封装，实现免疫细胞受体基因的精准解析，核心原理如下： 通过高密度DNA纳米球（DNB）阵列芯片，借助静电吸附作用原位捕获单个T/B细胞，避免传统物理封装导致的细胞丢失、变形及偏好性问题。针对TCR的V(D)J重排区域及BCR重链（IGH）、轻链（IGK/IGL）的V(D)J区域，设计特异性引物进行靶向扩增，同时引入专属细胞Barcode和分子Barcode，实现每个细胞及每条受体转录本的唯一标记。 扩增产物经DNB文库构建后，通过DNBSEQ测序平台完成高通量测序，依托Barcode序列将测序数据精准分配至对应单细胞。经序列比对、组装与注释，获得每个T/B细胞的完整V(D)J重排序列、克隆型分类及表达水平，可进一步与单细胞转录组数据联动，构建“受体克隆型-基因表达-细胞功能”的三维关联图谱，深度解析免疫应答分子机制。
文献案例
《Nature Methods》发表题为“Integrative mapping of human CD8⁺ T cells in inflammation and cancer”的研究，以单细胞免疫组库（Single-cell immune repertoire analysis）为核心，依托DNBelab单细胞V(D)J测序联合转录组技术，构建了百万级人类CD8⁺T细胞参考图谱，为泛疾病免疫机制研究提供了关键工具。研究整合68项研究、42种疾病情境的96万余个细胞样本，通过DNBelab技术同步捕获T细胞的TCR免疫组库序列与基因表达谱，结合深度学习模型scAtlasVAE实现大规模数据整合。结果清晰解析了CD8⁺T细胞的异质性特征，鉴定出三种功能各异的耗竭型亚型，且各亚型在癌症、自身免疫病中的TCR克隆共享模式存在显著差异。 该研究借助DNBelab技术的高通量与无偏捕获优势，实现了免疫组库与转录组数据的深度联动，为跨疾病场景的T细胞亚型自动标注、功能解析提供了标准化方案，彰显了国产单细胞V(D)J技术在大规模免疫组库研究中的核心价值，为疾病免疫机制解析与治疗靶点筛选奠定基础。
J-%E6%96%87%E7%8C%AE%E6%A1%88%E4%BE%8B-01.webp)
送样标准
细胞浓度1×10⁵-5×10⁶个/mL，体积≥1mL/份，无血清培养基重悬并添加0.04%牛血清白蛋白；4°C冷藏运输，避免震荡与反复冻融；细胞活性≥85%，经流式分选富集后优先送检，无红细胞、杂质聚团污染。
重量≥0.1g/份（肿瘤、淋巴结、脾脏等），取材后立即置于专用组织保存液中，4°C冷藏运输（严禁冷冻），24小时内送达；注明组织类型、部位及患者信息，避免组织坏死，适配间质丰富组织解离。
体积≥2mL/份，EDTA或肝素抗凝，4°C冷藏运输，6小时内送达；避免溶血，PBMC需新鲜分离且活性≥90%，注明采血时间、是否经免疫刺激处理，严禁使用冻融血样。
细胞沉淀≥5×10⁶个/份，用专用免疫细胞冻存液梯度冻存，液氮保存后干冰运输；解冻后立即制备单细胞悬液，快速洗涤去除冻存液，全程低温操作，冻存时间不超过3个月。
细胞量≥1×10⁶个/份，制备为单细胞悬液后4°C冷藏运输；注明培养时间、转染效率、体外刺激条件，确保细胞活性≥90%，便于解析CAR-T细胞克隆扩增与功能状态。
交付内容
原始测序数据
Fastq格式原始测序reads、Barcode分配统计数据、测序质量控制报告、V(D)J基因扩增原始数据及DNB文库构建参数。
数据分析报告
涵盖TCR/BCR克隆型注释结果、克隆多样性分析图、克隆扩增热力图、V/J基因使用频率统计、核心克隆功能关联分析及结论解读。
常见问题
反复冻融会导致免疫细胞活性骤降、受体基因降解断裂，同时释放游离核酸污染文库，显著降低有效克隆型获取量及序列完整性。若需使用冻存样品，需采用专用免疫细胞冻存液梯度降温冻存，解冻后2小时内完成建库，全程低温轻柔操作减少损伤。
借助DNBelab C4平台的多组学兼容特性，对同一样本同步开展V(D)J测序与单细胞转录组测序，通过共同的细胞Barcode实现数据精准关联。数据分析时可将每个细胞的受体克隆型与基因表达谱匹配，明确不同克隆型T/B细胞的功能表型、分化状态及信号通路特征，深度解析免疫细胞功能机制。
溶血会释放红细胞内的血红蛋白与核酸酶，不仅污染文库影响测序质量，还会降解免疫细胞受体基因，导致有效数据量下降。避免方案：采血时轻柔操作，使用抗凝管及时摇匀，4°C冷藏运输避免高温震荡，运输时间控制在6小时内，发现溶血样品需重新采集。
